铜绿假单胞菌产TEM-29型ESBL基因的克隆及原核表达

• 作者: 凌保东 刘刚 周岐新 赵廷坤 雷军
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 铜绿假单胞菌 ESBL TEM-29 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 612-614
• 页数: 3页
• 分类号: R378.99+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8689.2006.10.009

摘要

目的 研究临床分离铜绿假单胞菌Pa3-104产生的超广谱β-内酰胺酶的基因型,并对其进行原核表达,了解它的相关特性.方法 对该临床菌株进行接合试验;采用PCR扩增TEM型β-内酰胺酶编码基因的片段,克隆人pUCm-T载体,在E.coliJM109中表达,双脱氧链终止法测定核苷酸序列,确定基因型;并将TEM型β-内酰胺酶全编码基因克隆入原核表达载体pBK-CMV中进行原核表达;用三维试验检测重组菌产β-内酰胺酶的表型,等电聚焦电泳测定其表达蛋白的等电点(pI).结果 该临床菌株质粒接合试验为阳性;PCR扩增测序结果显示为TEM型,其基因片段含861个核苷酸,该TEM型β-内酰胺酶的编码基因与GenBank中大肠埃希菌产生的TEM-29的编码基因(Y17584)一致,等电聚焦电泳结果显示该酶的pI为5.4,三维试验证实为ESBL.结论 在国内首次从临床分离铜绿假单胞菌中发现TEM-29型ESBL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	凌保东	川北医学院药物研究所	74	681	13.0	23.0
2	周岐新	重庆医科大学药理教研室	190	1564	18.0	29.0
3	雷军	川北医学院药物研究所	64	171	7.0	8.0
4	刘刚	川北医学院药物研究所	36	100	5.0	8.0
6	赵廷坤	川北医学院药物研究所	5	31	2.0	5.0