塞来昔布减低HL－60和HL－60A细胞活力、诱导凋亡及抑制自噬

• 作者: 冯宝莹 刘玲玲 刘相富 张祥忠 林哲生 陆英 陈玉婵
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 塞来昔布 急性髓细胞白血病 细胞凋亡 自噬
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-25
• 页数: 8页
• 分类号: R733.72
• 字数: 4546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2017.01.004

摘要

目的：探讨塞来昔布对急性髓细胞白血病（AML） HL－60细胞和HL－60A细胞的活力、凋亡及自噬的影响。方法：用不同浓度的（0、20、40、60、80和100μmol／L）塞来昔布作用于HL－60细胞和HL－60A细胞，24 h、48 h和72 h后用MTT法检测细胞活力。用流式细胞术检测塞来昔布作用HL－60细胞和HL－60A细胞24 h后的凋亡率。用Western blot法检测凋亡相关蛋白cleaved caspase－3、cleaved PARP，自噬相关蛋白LC3、P62，以及mTOR信号途径相关蛋白。结果：塞来昔布作用于HL－60细胞24 h、48 h和72 h的 IC50分别为49．4μmol／L、32．0μmol／L和25．1μmol／L，对于HL－60A细胞，相应的IC50分别是69．1μmol／L、42．5μmol／L和29．6μmol／L。塞来昔布作用24 h后，流式细胞术检测显示HL－60细胞中Annexin－Ⅴ＋PI－、Annexin－Ⅴ＋PI＋及Annexin－Ⅴ－PI＋细胞的比例增多；HL－60A细胞中Annexin－Ⅴ＋PI－及Annexin－Ⅴ＋PI＋细胞的比例增多。 Western blot实验结果显示塞来昔布作用后， cleaved caspase－3和cleaved PARP的蛋白水平增高，提示该凋亡作用是通过caspase途径的。自噬相关蛋白LC3Ⅱ及P62的表达均增加，mTOR、p－mTOR以及下游的4－EBP、p－4－EBP的蛋白水平没有变化，说明塞来昔布能够抑制AML细胞自噬，该作用与mTOR途径无关。结论：塞来昔布对HL－60细胞和HL－60A细胞活力的抑制作用呈浓度以及时间依赖性，该作用与塞来昔布诱导细胞凋亡及坏死有关。塞来昔布能够通过非mTOR依赖途径抑制AML细胞自噬，有望联合应用于AML的治疗，有助于增强某些引起保护性自噬的化疗药物的细胞毒作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张祥忠	中山大学附属第三医院血液科	42	237	7.0	14.0
2	林哲生	中山大学附属第三医院输血科	7	14	2.0	3.0
3	陆英	中山大学附属第三医院输血科	34	230	8.0	13.0
7	刘相富	中山大学附属第三医院输血科	36	125	7.0	9.0
8	刘玲玲	中山大学附属第三医院血液科	5	14	3.0	3.0
9	陈玉婵	中山大学附属第三医院输血科	6	17	2.0	4.0
10	冯宝莹	中山大学附属第三医院输血科	4	8	2.0	2.0