藤黄酸的心脏毒性及其基于细胞表型的多指标量化表征

• 作者: 朱彦 王萌 祝婕
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 心脏毒性 藤黄酸 H9c2细胞 高内涵筛选
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 73-79
• 页数: 7页
• 分类号: R285.1
• 字数: 4818字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2017.01.009

摘要

目的：建立基于细胞表型心脏毒性多指标同步量化表征方法，评价广谱抗癌药藤黄酸的心脏毒性。方法采用H9c2心肌细胞系，以多柔比星（Dox）和胺碘酮（Ami）为阳性药对照，1‰DMSO为溶剂对照组，次乌头碱为阴性对照组，应用高内涵分析多通道活细胞成像，收集细胞形态变化以及各指标探针的荧光强度，考察1×10-14～1×10-8mol·L-1浓度范围药物对心肌细胞存活率、细胞核、线粒体形态和功能及胞内钙离子含量的影响，以药物半数有效量（EC50）判断药物对心肌细胞影响程度，以Z′值判断所建方法的精密度和假阳性率。结果 Dox降低细胞数，导致细胞核胀大，线粒体质量增加，EC50分别为0.72，0.014和1.21μmol·L-1，且在浓度为10μmol·L-1时导致胞内钙稳态失衡。Ami导致心肌细胞数下降，细胞核缩小及线粒体质量减少，EC50值分别为14.83，6.72和4.54μmol·L-1，高通量筛选Z′值平均为0.5。次乌头碱对心肌细胞的细胞核和胞内钙离子含量无影响，但改变了线粒体的纹理，纹理分析值降低。藤黄酸对心肌细胞有严重的杀伤作用，使细胞存活率下降，细胞核减小以及胞内钙离子浓度降低，EC50分别为0.24，1.16和0.41μmol·L-1。藤黄酸使线粒体质量降低，线粒体纹理数值降低以及线粒体面积增加，EC50分别为1.21，0.99和0.44μmol·L-1。结论使用高内涵分析多通道活细胞成像技术所评价的阳性药EC50效量和现有报道接近；多指标同步量化对藤黄酸的心脏毒性进行了较为全面的分析，并对其毒性作用机制做出初步的判断。