青虾Ran基因的克隆、表达及其在卵巢发育中的功能

• 作者: 乔慧 傅洪拓 卜宗元 吴滟 孙盛明 张文宜 熊贻伟 蒋速飞 金舒博 龚永生
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 青虾 Ran基因 克隆 卵巢发育 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 459-469
• 页数: 11页
• 分类号: S917
• 字数: 6583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2017.16365

摘要

本研究应用RACE技术克隆了青虾(Macrobrachium nipponensis)Ran(Ras related nuclear protein,Ras相关核蛋白)基因全长cDNA序列,该基因cDNA全长1191 bp,包括218 bp的5′UTR,648 bp的开放阅读框(ORF),405 bp的3′UTR,编码215个氨基酸.青虾Ran基因属于P-loop-NTPase超级家族,拥有PTZ00132跨结构域,多肽分子量约为24.57 kDa,理论等电点7.13.系统进化树分析表明,在动物界进化中非常保守的青虾Ran多肽与罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)聚为一支,具有最近的亲缘关系.使用荧光定量PCR技术检测Ran基因在成体青虾不同组织和卵巢不同发育期的表达差异,结果显示,Ran基因在青虾不同组织中均有表达,其表达量在卵巢中最高,是精巢表达量的7~8倍;随着卵巢的发育,Ran基因的表达水平呈现上升趋势,在卵巢消退期又恢复到较低水平.RNA干扰后,实验组Ran基因表达量显著低于对照组(P<0.05),同时卵巢发育关键基因Vg(vitellogenin)在卵巢中的表达量也显著低于对照组(P<0.05),推测Ran基因参与雌性卵巢发育过程并对Vg基因的表达起到调控作用.