动力相关蛋白1通过诱导线粒体自噬对高糖导致心肌细胞损伤的影响

• 作者: 余文军 张国勇 张英梅 林晨 王婷婷 高蓓蕾 黎翔
• 来源期刊: 心脏杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 动力相关蛋白1 线粒体自噬 糖尿病心肌病
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 506-511
• 页数: 6页
• 分类号: R392.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13191/j.chj.2017.0128

摘要

目的 明确动力相关蛋白(Drp)1通过诱导线粒体自噬对高糖条件下心肌细胞起保护作用.方法 以Lac Z空病毒(LV-LacZ)或Drp1过表达腺病毒(LV-Drp1)转染大鼠原代心肌细胞24 h,再用含葡萄糖(5.5 mmol/L)的正常培养基(NG)或含葡萄糖(33 mmol/L)的高糖培养基(HG)处理大鼠心肌细胞72 h.实验分组:1:①阴性对照(NG+ LacZ)组;②正常Drp1过表达(NG+ Drp1)组;③高糖阴性对照(HG+LacZ)组;④高糖Drp1过表达(HG+ Drp1)组.采用免疫荧光法检测自噬体数量,用JC-1染色法检测线粒体膜电位水平,采用Westem blot法检测Drp1、Parkin(一种E3泛素化连接酶),微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62蛋白表达水平,TUNEL法检测细胞凋亡率.结果 与对照组相比,高糖处理组自噬体数量明显减少(P＜0.05),线粒体膜电位显著下降(P＜0.05),线粒体自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、Parkin水平下调(P＜0.05),Drp1,P62表达水平显著增高(P＜0.05),心肌细胞凋亡率升高(P＜0.05);与高糖组比较,Drp1过表达组可显著增加自噬体数量(P＜0.05),线粒体膜电位上升(P＜0.05),Drp1,Parkin,LC3-Ⅱ表达水平显著上升(P＜0.05),P62水平显著下降(P＜0.05),心肌细胞凋亡率下降(P＜0.05).结论 高糖可引起SD大鼠原代心肌细胞自噬水平降低和线粒体功能障碍,是糖尿病心肌病发病机制之一.Drp1通过提高线粒体自噬水平改善线粒体功能,降低高糖条件下心肌细胞凋亡率.