摘要:
目的 研究不同浓度亚砷酸钠(NaAsO2)对人正常肝细胞L-02存活情况、细胞内活性氧(ROS)水平及细胞凋亡的影响.方法 用0(对照组)、50、100、150 μmol/L NaAsO2作用L-02肝细胞24h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTr)法检测L-02肝细胞存活率,流式细胞仪检测L-02肝细胞内ROS水平和细胞早期(Q4期)、晚期(Q2期)凋亡程度.结果 细胞存活率检测:不同浓度NaAsO2组细胞存活率比较,差异有统计学意义(F=350.51,P<0.05),其中50、100、150μmol/L NaAsO2组细胞存活率[(87.30±3.74)%、(49.03±4.72)%、(13.44±4.01)%]显著低于对照组[(100.00±0.00)%,P均<0.05];与50 μmol/L NaAsO2组比较,100、150μmol/L NaAsO2组细胞存活率显著下降(P均<0.05);与100 μmol/L NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组细胞存活率显著下降(P<0.05).ROS水平检测:不同浓度NaAsO2组细胞内ROS水平比较,差异有统计学意义(F =407.78,P<0.05),其中100、150 μmol/LNaAsO2组细胞内ROS水平(3 212.00±22193、5 521.33±179.63)显著高于对照组(1 691.67±73.98,P均<0.05);与50 μmol/L NaAsO2组(1 927.67±62.45)比较,100、150μmol/L NaAsO2组细胞内ROS水平显著增加(P均<0.05);与100 μmol/NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组细胞内ROS水平显著增加(P<0.05).细胞凋亡检测:不同浓度NaAsO2组Q2期(晚期凋亡细胞)、Q4期(早期凋亡细胞)、Q2+ Q4期(总凋亡细胞)细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(F=256.84、26.53、63.89,P均<0.05),除50 μmol/L NaAsO2组Q4期[(5.43±0.57)%]外,50 μmol/LNaAsO2组[Q2期:(5.67±021)%,Q2+ Q4期:(11.10±0.40)%]、100 μmol/L NaAsO2组[Q2期:(13.60±0.79)%,Q4期:(7.37±2.01)%,Q2+Q4期:(20.97±2.38)%]、150 μmol/L NaAsO2组[Q2期:(13.47±0.78)%,Q4期:(16.97±3.45)%,Q2+Q4期:(30.43±3.84)%]细胞凋亡率均显著高于对照组[Q2期:(3.47±0.12)%,Q4期:(2.90±0.90)%,Q2+Q4期:(6.37±1.00)%,P均<0.05];与50 μmol/L NaAsO2组比较,100、150 μmol/L NaAsO2组Q2、Q4、Q2+ Q4期凋亡细胞增加,除100 μmol/L NaAsO2组Q4期外,差异有统计学意义(P均<0.05);与100 μmol/L NaAsO2组比较,150 μmol/L NaAsO2组Q4、Q2+Q4期凋亡细胞均显著增加,差异有统计学意义(P均<0.05).结论 NaAsO2可以诱导L-02肝细胞内ROS含量增加,推测NaAsO2可通过氧化损伤作用进一步诱导L-02肝细胞发生早期和晚期凋亡,从而抑制L-02肝细胞的生长.