非洲绿猴肾细胞中猪圆环病毒1型的检测

• 作者: 于晴川 刘悦越 刘艳 国泰 张韵祺 李东 杜加亮 范行良 赵荣荣 高加梅
• 来源期刊: 国际生物制品学杂志
• 关键词: 圆环病毒属 Vero细胞 聚合酶链反应 显微镜检查,电子 原位杂交
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 62-66
• 页数: 5页
• 字数: 4141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2017.02.003

摘要

目的 建立轮状病毒疫苗污染事件中的外源因子猪圆环病毒1型(porcine circovirus type 1,PCV1)感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的检测方法.方法 培养感染PCV1的Vero细胞6d后,通过定性PCR、定量PCR、电子显微镜(电镜)检查和原位杂交检测PCV1的复制与增殖.结果 从感染PCV1的Vero细胞培养物提取的DNA,其PCR扩增产物琼脂糖凝胶电泳可见特异性条带;定量PCR检测显示,感染6d后病毒总拷贝数是感染前的794.3倍;定性和定量PCR的最低检出浓度均为102.0拷贝/ml;电镜观察到PCV1特征性形态病毒颗粒;原位杂交检测到出现深色阳性信号的PCV1阳性细胞.结论 PCV1感染Vero细胞后的复制增殖可以通过上述方法进行检测.