罗非鱼脯氨酸内肽酶的分离及抑制剂对其的作用机制

• 作者: 刘光明 曹敏杰 翁凌 肖琳琳 钟婵
• 来源期刊: 集美大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 罗非鱼 脯氨酸内肽酶 纯化 抑制机理
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 水产、食品与生物技术
• 页码范围: 10-20
• 页数: 11页
• 分类号: Q51|S917.4
• 字数: 5563字
• 语种: 中文

摘要

采用硫酸铵盐析及柱层析技术,从罗非鱼肌肉中分离纯化得到分子质量约为85 ku的脯氨酸内肽酶(prolyl endopeptidase,PEP).通过肽质量指纹质谱分析,获得13个肽片段,含128个氨基酸残基,结果显示,与伯氏朴丽鱼(Haplochromis burtoni)的PEP完全一致.该酶特异分解荧光底物Suc-Gly-Pro-MCA和Suc-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro-MCA,PEP特异性抑制剂SUAM-14746和丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF可以抑制该酶的活性.PEP催化Suc-Gly-Pro-MCA水解反应的活化能(Ea)为47.42 kJ/mol.SUAM-14746对PEP表现为竞争性抑制作用,抑制常数(KI)为1.91 μmol/L.金属离子Zn2和Cu2对PEP的抑制类型均为混合型抑制,其中对游离酶的抑制常数(KI)分别为1.80 mmol/L和0.07mmol/L,对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为2.33 mmol/L和1.17 mmol/L.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹敏杰	集美大学食品与生物工程学院	85	824	18.0	23.0
3	刘光明	集美大学食品与生物工程学院	68	501	13.0	18.0
5	翁凌	集美大学食品与生物工程学院	31	220	9.0	13.0
7	钟婵	集美大学食品与生物工程学院	6	24	4.0	4.0
12	肖琳琳	集美大学食品与生物工程学院	1	3	1.0	1.0