蓝圆鲹骨骼肌内源性脯氨酸内肽酶抑制剂的纯化及其抑制机理

• 作者: 刘光明 孙乐常 张凌晶 曹敏杰 谢雪琼 钟婵
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 蓝圆鲹 脯氨酸内肽酶 内源性抑制剂 抑制动力学 二级结构
• 年，卷（期）: 2019,（24）
• 所属期刊栏目: 食品化学
• 页码范围: 15-20
• 页数: 6页
• 分类号: TS254.4
• 字数: 4327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-20181210-117

摘要

对蓝圆鲹(Decapterus maruadsi)骨骼肌采用热处理、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose弱阴离子交换柱层析、Sephacryl S-200 HR凝胶过滤层析和HiTrap Q HP强阴离子交换柱层析相结合方法,分离、纯化出一种内源性脯氨酸内肽酶抑制剂(prolyl endopeptidase inhibitor,PEPI).研究了PEPI对脯氨酸内肽酶(prolyl endopeptidase, PEP)活性的影响及抑制机理.Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳分析表明纯化的PEPI分子质量约为10kDa,具有较强的热稳定性和酸碱耐受性,其为丝氨酸蛋白酶类PEP的专一性、可逆竞争型抑制剂,抑制常数Ki为0.34 μmol/L.PEPI与PEP形成复合物后,α-螺旋、无规卷曲比例增加,β-折叠比例减少,PEP活性中心构象的改变是酶活力被抑制的主要原因.