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摘要:
试验通过PCR分别获得PCV2a和PCV2b的Cap基因,顺次克隆入pFastBac-Dual载体质粒,获得携带2a和2b型Cap基因的重组质粒Cap-pFastBacDual,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒Cap-Bacmid,以脂质体法将重组杆粒转染Sf9细胞,获得表达Cap蛋白的重组杆状病毒.PCR能从重组杆状病毒中扩增出相应大小的Cap基因片段,蛋白电泳和ELISA法鉴定表明,Cap蛋白成功表达.采用重组杆状病毒肌内注射免疫小鼠(每只相当于8 μg Cap蛋白),免疫后14 d血清中产生PCV2抗体,免疫后28 d用PCV2a和PCV2b强毒株攻击,荧光定量PCR法检测结果显示,免疫组小鼠脾脏中PCV2基因组拷贝数极显著低于未免疫对照组.结果表明,PCV2a和PCV2b双亚型重组Cap蛋白能开发成猪圆环病毒防控的新型疫苗.
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文献信息
篇名 猪圆环病毒2a和2b双亚型Cap蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及对小鼠的免疫效果试验
来源期刊 浙江畜牧兽医 学科 农学
关键词 PCV Cap基因 重组质粒 免疫效果
年,卷(期) 2017,(3) 所属期刊栏目 试验研究
研究方向 页码范围 1-5
页数 5页 分类号 S858.28
字数 4281字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 方维焕 浙江大学动物科学学院 103 1066 20.0 26.0
2 李宝臣 4 18 3.0 4.0
3 吴桃芬 浙江大学动物科学学院 2 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
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PCV
Cap基因
重组质粒
免疫效果
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浙江畜牧兽医
双月刊
1005-7307
33-1098/S
大16开
杭州市凯旋路268号浙江大学动物科学学院
1955
chi
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