少孢节丛孢菌新疆分离株几丁质酶AO-14基因的克隆表达

• 作者: 乔军 孟庆玲 才学鹏 贡莎莎 钟文强 陈英
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 少孢节丛孢菌 几丁质酶 AO-14基因 克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 临床兽医
• 页码范围: 118-123
• 页数: 6页
• 分类号: S855.9+9
• 字数: 3960字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR扩增获得少孢节丛孢菌新疆分离株XJ-A1几丁质酶AO-14目的基因片段,对该基因进行克隆和分子特征分析;构建重组表达质粒pET32a-A014,转化到大肠杆菌进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析表达的重组蛋白.结果表明,AO-14基因eDNA全长为1 200 bp,编码399个氨基酸;编码蛋白几丁质酶AO-14属于糖苷水解酶18家族,具有典型的几丁质酶催化区保守序列SXGG和DGXDXD-WE,氨基酸序列的第131～ 139为活性位点所在区域,无信号肽序列.SDS-PAGE分析结果显示,AO-14表达产物的分子质量约为60ku;Western-blot分析结果表明,重组蛋白可以与抗少孢节丛孢菌多克隆抗体发生反应,证实在大肠杆菌中实现了少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-14基因的表达,为进一步研究少孢节丛孢菌几丁质酶AO-14生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所	141	790	15.0	21.0
2	乔军	石河子大学动物科技学院	103	346	8.0	14.0
3	孟庆玲	石河子大学动物科技学院	77	254	7.0	13.0
4	陈英	石河子大学动物科技学院	17	74	5.0	8.0
5	钟文强	石河子大学动物科技学院	10	4	1.0	1.0
6	贡莎莎	石河子大学动物科技学院	18	18	2.0	3.0