肠道病毒71型荧光定量PCR方法的比较与评价

• 作者: 卫海燕 潘静静 王若琳 程宁宁 许汴利 赵伊珂 郭万申 黄学勇
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 荧光定量PCR TaqMan探针
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 541-544
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2
• 字数: 3074字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2017.05.006

摘要

目的:定量检测肠道病毒71型(EV71)临床标本中病毒拷贝数,评价3种商业化TaqMan探针荧光定量PCR方法.方法:将VP1全序连接到克隆质粒pMAL-c2X上,纯化的质粒作为标准品.选取河南开封手足口病监测试点的105份手足口病患儿粪便标本,分别应用bioPerfectus Technologies(方法A)、KINGHAWK(方法B)和Beijing ABT(方法C)公司的荧光定量PCR方法进行检测,比较EV71阳性检出率和定量分析结果的差异,分析3种方法的一致性.结果:成功构建重组质粒并绘制标准曲线,方程为Y=-3.35 X+47.49;分别用方法A、B、C对105份标本进行检测,EV71阳性检出率分别为41.90%(44/105)、42.86%(45/105)和41.90%(44/105),差异无统计学意义(P=0.987);CT值分别为(24.34±3.92)、(25.08±3.94)和(14.17±3.19),差异有统计学意义(P<0.001),方法C测得的CT值小于方法A和B(P<0.05);3种方法最低检测限值分别为102、10和102拷贝,灵敏度分别为93.62%、95.74%和93.62%,特异度分别为100.00%、75.00%和100.00%;一致性分析结果显示,3种方法一致性较差.结论:商业化的EV71荧光定量PCR试剂盒适用于定性检测临床标本,定量检测EV71方法需要进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许汴利	河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所	148	1187	16.0	24.0
2	黄学勇	河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所	93	505	10.0	17.0
3	潘静静	河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所	23	258	9.0	15.0
4	程宁宁	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	3	7	2.0	2.0
5	赵伊珂	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	2	6	2.0	2.0
6	卫海燕	河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所	20	62	5.0	7.0
7	王若琳	河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所	12	17	2.0	3.0