EV71-CA16肠道病毒荧光定量RT-PCR诊断试剂盒的研制

• 作者: 于浩洋 刘晓青 卢秋梅 陈勉乔 陈立嘉
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 荧光定量RT-PCR EV71,CA16肠道病毒 快速检测
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: Q503
• 字数: 3579字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2015.06.008

摘要

目的 研制一种能同时检测EV71,CA16肠道病毒的二联实时荧光定量PCR检测试剂盒,主要用于EV71,CA16肠道病毒的快速检测和流行病学监测.方法 设计特异度的EV71型、CA16型基因的引物和探针,优化实时荧光定量PCR检测体系,并研究产品的灵敏度、精密度、稳定性和检测线性范围;同时对2014年5月份收集的26份样品进行检测.结果 试验得到了阳性重组质粒,线性范围在5* 102 copies/μl～105 copies/μl,该范围内检测结果良好;优化后肠道病毒CA16上下游引物和探针浓度分别为0.48,0.24μmol/L,EV71上下游引物和探针浓度分别为0.40,0.20 μmol/L.敏感度达到500 copies/μl,重复性变异系数CV≤5％;该荧光定量PCR检测试剂盒稳定性强,在-20℃下可以保存一年,对EV71,CA16肠道病毒具有良好的特异度.用该方法检测20份临床阳性样品和6份阴性样品,阳性检出率为100％ (20/20),阴性检出率为100％(6/6).结论 试验建立的EV71,CA16肠道病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法可用于EV71,CA16肠道病毒的临床诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	卢秋梅		5	5	2.0	2.0
2	陈勉乔		2	4	1.0	2.0
3	于浩洋		2	4	1.0	2.0
4	刘晓青		2	3	1.0	1.0
5	陈立嘉		1	3	1.0	1.0