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SB转座子介导的斑马鱼增强子捕获注解分析
SB转座子介导的斑马鱼增强子捕获注解分析
作者:
刘帅军
宋成义
张丽
杨昆仑
沈丹
王伟
钟继汉
陈伟
陈才
高波
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
增强子捕获
注解
SB
斑马鱼
摘要:
为了建立斑马鱼增强子捕获突变体库及研究功能基因的表达调控模式,制备了SB转座子介导的增强子捕获转基因斑马鱼(F0),通过繁育建立了组织或器官特异表达报告基因绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的品系(F1).选择F1代的SK-3系(脑部特异表达GFP)与野生型TU系斑马鱼交配,收集受精卵(F2),于24 hpf(Hour post fertilization)、2 dpf(Day post fertilization)、3 dpf、4 dpf、5 dpf、7 dpf 6个发育阶段检测报告基因绿色荧光蛋白的表达模式;然后通过Splinkerette PCR(SP-PCR)方法检测SB转座子在斑马鱼基因组中的插入位置,从而确定捕获的增强子和功能基因;最后通过胚胎原位杂交验证内源基因表达模式.结果表明,在F2代胚胎不同发育阶段,GFP表达具有明显的时空特性,前期在前脑,中脑,后脑三个部位均高水平表达,后期表达部位呈后移趋势,各个发育期表达强度基本无变化,结果提示该捕获增强子具有脑部表达特性.sp-PCR结果分析表明增强子位于基因组1号染色体35、914、498-35、914、621位置,在内源性基因ednraa位点附近.原位杂交结果表明该基因在胚胎24 hpf阶段具有转录活性.本研究结果提示SB转座子介导的增强子捕获技术可高效获得插入突变斑马鱼,对研究基因功能和获得具有自主知识产权的新基因具有重要作用.
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篇名
SB转座子介导的斑马鱼增强子捕获注解分析
来源期刊
生物技术通报
学科
关键词
增强子捕获
注解
SB
斑马鱼
年,卷(期)
2017,(5)
所属期刊栏目
研究报告
研究方向
页码范围
153-158
页数
6页
分类号
字数
语种
中文
DOI
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0035
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主办单位:
中国农业科学院农业信息研究所
出版周期:
月刊
ISSN:
1002-5464
CN:
11-2396/Q
开本:
大16开
出版地:
北京海淀区中关村南大街12号
邮发代号:
18-92
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7180
总下载数(次)
42
总被引数(次)
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