EV71病毒对树鼩原代肾上皮细胞感染模型的建立

• 作者: 代解杰 冯悦 夏雪山 张莉 杨铭 王文广 胡晓星 董书维
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 树鼩原代肾细胞 EV71 病毒增殖 VP1蛋白 感染模型
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 117-122
• 页数: 6页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 4374字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2017.02.002

摘要

目的 建立EV71对树鼩原代肾细胞的感染模型.方法 胰蛋白酶消化法获得树鼩的原代肾细胞,用EV71感染树鼩肾细胞,测定1、2、4、6和8 d培养上清病毒滴度,分别用Western blot和间接免疫荧光法检测细胞中EV71病毒VP1蛋白的表达,以确定EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性.结果 对分离得到的树鼩原代肾细胞进行传代纯化和形态鉴别,建立以树鼩原代肾细胞为主的细胞培养.用EV71病毒感染树鼩原代肾细胞,感染后48 ~ 96 h病毒滴度可达到1.3×106 TCID 50/mL,说明EV71病毒可有效感染树鼩原代肾细胞并有效增殖.Western blot检测发现,EV71病毒VP1蛋白可在感染后2 ~ 8 d的树鼩原代肾细胞中有效检出,间接免疫荧光法则在感染后2 ~ 6 d细胞的细胞质中检测到病毒VP1蛋白的分布.结论 在成功建立树鼩原代肾细胞培养的基础上,确定了EV71病毒对树鼩原代肾细胞的感染性和病毒增殖特性,初步建立了EV71树鼩原代肾细胞感染模型.