敲低RACK1基因抑制C2C12细胞中MyoG和MHC基因表达

• 作者: 刘妍 刘玉兰 张晶 汪文俊 王胜军
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 成肌细胞 激活性蛋白激酶C受体1 肌细胞生成素 肌球蛋白重链 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 106-111
• 页数: 6页
• 分类号: S814.5
• 字数: 3109字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19556/j.0258-7033.2017-03-106

摘要

本实验旨在研究RNA干扰(RNAi) RACK1基因对C2C12成肌细胞中肌分化标志基因MHC和MyoG表达的影响.将人工合成的靶向RAKC1基因的3条siRNA(1,2,3)转染C2C12细胞,用RT-qPCR方法检测并筛选干扰效率最高的1条siRNA.将筛选出的siRNA转染C2C12成肌细胞并诱导细胞分化,通过RT-qPCR、Western blot和免疫荧光方法在mRNA及蛋白水平检测RACK1基因沉默后对MHC和MyoG表达的影响.此外,Western blot方法检测RACK1基因沉默后对PI3K/Akt和Erk/MAPK通路激活的影响.结果表明:RACK1-siRNA-2干扰效率最高,转染48 h后抑制率可达70％.随后,C2C12细胞转染siRNA-2,诱导分化48h后RT-qPCR表明,MHC和MyoG的mRNA表达均显著性下调(P＜0.05);诱导分化72 h后,Western blot和免疫荧光结果表明MHC和MyoG的蛋白表达明显低于对照组,但AKT和Erk磷酸化水平未见明显变化.上述结果表明,干扰RACK1能显著抑制MHC和MyoG的表达,提示RACK1正向调控C2C12成肌细胞的分化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪文俊	中南民族大学生命科学学院	19	98	6.0	9.0
2	张晶	武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室	12	22	3.0	4.0
3	刘妍	武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室	7	3	1.0	1.0
7	刘玉兰	武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室	20	18	3.0	3.0
8	王胜军	武汉轻工大学动物营养与饲料科学湖北省重点实验室	2	1	1.0	1.0