人微RNA150通过Ras-相互作用蛋白1调节胃癌侵袭和转移的作用机制

• 作者: 倪银 孙仁华 张锦丽
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 关键词: 胃肿瘤 微RNA150 RASIP1 侵袭 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 319-325
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2017.05.008

摘要

目的 探讨人miRNA对胃癌增殖、侵袭和转移的影响及其作用机制.方法 收集2015年1月至2016年6月手术切除的胃癌标本45份,实时荧光定量PCR法检测胃癌组织和癌旁组织的miRNA和Ras-相互作用蛋白1(RASIP1)mRNA表达水平,分析miRNA150与胃癌肿瘤生物学特征和RASIP1表达的相关性.体外培养胃癌SGC-7901细胞,并转染pcDNA3.1-miRNA150表达质粒,采用MTT法分析miRNA150过表达对SGC-7901细胞增殖的影响,Transwell实验分析miRNA150过表达对SGC-7901细胞侵袭和转移的影响.使用生物信息学软件和双荧光酶报告分析确定miRNA150的靶基因.实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分析miRNA150过表达对SGC-7901细胞中RASIP1表达的影响.正态分布数据的比较采用t检验和单因素方差分析,偏态分布数据间比较采用Mann-Whitney秩和检验,相关性分析采用Spearman分析.结果 胃癌组织miRNA150的中位水平高于癌旁组织[3.85(0.26,7.92)比1.98(0.19,5.66)],差异有统计学意义(U=466.22,P<0.05).胃癌组织RASIP1 mRNA的中位表达水平为1.65(0.13,3.59),低于癌旁组织的2.96(0.59,6.08),差异有统计学意义(U=522.31,P<0.05).相关性分析显示,RASIP表达强度与miRNA150表达水平呈负相关(r=-0.589,P=0.008);RASIP1 mRNA表达水平与miRNA150表达水平呈负相关(r=-0.614,P=0.004).双荧光酶报告试验显示,RASIP1为miRNA150的靶基因.miRNA150表达水平与肿瘤的大小、TNM分期和淋巴结转移均有关(χ2=5.81、6.00、10.04,P均<0.05).MTT实验显示,培养SGC-7901细胞后24 h,与未转染的SGC-7901细胞相比,转染pcDNA3.1-miRNA150质粒的细胞吸光度(A)值较高(0.51±0.04比0.79±0.03),差异有统计学意义(t=4.745,P<0.05).Transwell实验显示,转染pcDNA3.1-miRNA150质粒的细胞侵袭和转移的数量更多.实时定量PCR显示,与未转染和转染空质粒的SGC-7901细胞相比, 转染pcDNA3.1-miRNA150质粒的SGC-7901细胞RASIP1 mRNA表达水平较低(分别为1.00±0.02、1.08±0.03、0.51±0.03),差异均有统计学意义(t=3.940、4.120,P均<0.05).结论 过高的miRNA150水平可能通过下调RASIP1的表达诱导胃癌发生侵袭和转移.miRNA150可能作为胃癌转移诊断和治疗的新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙仁华	浙江省人民医院重症医学科	61	189	7.0	9.0
2	倪银	浙江省人民医院重症医学科	9	31	3.0	5.0
3	张锦丽	浙江省医疗健康集团杭州医院重症医学科	2	0	0.0	0.0