类鼻疽伯克霍尔德菌BPSS1622蛋白免疫原性鉴定与亚细胞定位

• 作者: 李倩 毛旭虎 胡志强 胡艺 金浩龙 韩丹 马腾飞
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 类鼻疽伯克霍尔德菌 BPSS1622蛋白 免疫血清 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 771-776
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20170136

摘要

目的 重组表达类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)BPSS1622蛋白并鉴定其免疫原性及亚细胞定位.方法 以pET-22b为表达载体,在大肠埃希菌BL21中表达BPSS1622蛋白;亲和层析纯化目的蛋白;用纯化后蛋白免疫新西兰兔获得抗血清;ELISA及Western blot鉴定纯化蛋白的免疫原性,并对类鼻疽杆菌BPSS1622蛋白进行亚细胞定位,探讨其生物学功能.结果 以菌株BPC006基因组DNA为模板,通过PCR获得目的基因,构建pET-22b/ BPSS1622重组质粒;转化至E.coli BL21获得工程菌株,经IPTG诱导表达、纯化得到了相对分子质量为22 000的目的蛋白;制备的抗血清ELISA效价高达1∶1 200000,并能与目的蛋白发生特异性抗原抗体反应;亚细胞定位发现BPSS1622蛋白定位于类鼻疽杆菌的胞壁及胞膜中.结论 成功克隆和表达了类鼻疽杆菌的BPSS1622蛋白,制备了免疫血清,该蛋白定位于细菌的细胞膜和细胞壁中,预测该蛋白具有ATP依赖的RNA解旋酶活性,为疾病诊断和预防奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李倩		17	23	3.0	4.0
2	毛旭虎		87	417	12.0	16.0
3	金浩龙		4	7	2.0	2.0
4	胡艺		2	2	1.0	1.0
5	马腾飞		1	0	0.0	0.0
6	韩丹		1	0	0.0	0.0
7	胡志强		1	0	0.0	0.0