希瓦氏菌(Shewanella marinintestina MCCC1A01703)二十碳五烯酸生物合成基因簇的钓取及鉴定

• 作者: 倪孟祥 戈梅 朱丽 盛超亚
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 希瓦氏菌 二十碳五烯酸 生物合成基因簇 异源表达
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 12-19
• 页数: 8页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 3751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2017.02.002

摘要

希瓦氏菌(Shewanella marinintestina MCCC 1 A01703)是从海洋动物肠道分离得到的1株产二十碳五烯酸(Ecicosapentaenoic acid,EPA)的海洋细菌.利用PCR方法、Overlap PCR及Gibson Assemble技术克隆该菌中包含加A、pfaB、pfaC和pfaD的EPA生物合成基因簇,全长18.4 kb.序列分析表明所钓取的合成基因簇与来自希瓦氏菌SCRC-2738的EPA合成基因簇有88％的相似度,均编码聚酮合酶.以构建的低拷贝表达载体pACYC-Trc为骨架,通过Gibson Assemble技术构建EPA基因簇表达质粒pLYSCY03.钓取大肠埃希菌(Escherichia coli DH5α)细胞中的entD基因,克隆至表达载体pTrc99a中,构建成为重组质粒pLYSCY01.将两个表达质粒同时导入大肠埃希菌(Escherichia coli DH5c)中,获得产EPA的工程菌株.结果表明,希瓦氏菌中含有EPA聚酮生物合成基因簇,大肠埃希菌(Escherichia coli DH5α)中的entD基因可以替代pfaE基因与钓取的EPA合成基因协同合成EPA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱丽		34	136	6.0	11.0
3	倪孟祥	中国药科大学生命科学与技术学院	54	283	11.0	15.0
4	戈梅	上海交通大学药学院	7	9	1.0	2.0
7	盛超亚	中国药科大学生命科学与技术学院	1	0	0.0	0.0