禽源H9N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的建立

• 作者: 于海 刘晓敏 单同领 宫晓倩 张鹏 杨海明 汪琪 童光志 童武 阮宝阳
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 H9N2 RT-PCR 病毒拯救 反向遗传操作平台
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 病毒
• 页码范围: 29-34
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 4318字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR技术扩增了禽源H9N2亚型猪流感病毒A/Swine/Guangxi/7/2007(H9N2)的8个目的基因片段,分别克隆至pBD双向转录表达载体.将8个重组质粒纯化后共转染293T细胞,54 h后收集上清,接种MDCK细胞.当拯救的病毒在MDCK细胞上增殖至第3代时,收集的细胞上清经检测具有血凝效价.经过测序分析,确定获救病毒的8个基因片段序列与野生株完全一致,表明病毒拯救成功.禽源H9N2亚型猪流感病毒反向遗传操作技术平台的成功建立为探索猪流感病毒致病机理、传播机制与基因功能研究奠定了基础.