分子佐剂鞭毛素对弓形虫SAG1蛋白抗体应答的影响

• 作者: 唐静静 殷光文 黄志坚 黄驹辉 龚丽贞
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 弓形虫 表面抗原1(SAG1) 鞭毛素 体液免疫
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 318-322
• 页数: 5页
• 分类号: S852.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.13323/j.cnki.j.fafu(nat.sci.).2017.03.014

摘要

将沙门氏菌鞭毛素和弓形虫免疫优势表面抗原1(SAG1)融合表达,研究其在小鼠上激发的体液免疫应答.首先,采用PCR扩增SAG1片段.其次,将SAG1连接到原核表达载体pET-28a中构建表达质粒pET-28a-SAG1;连接到实验室已有的pET-28a鞭毛素质粒中构建表达质粒pET-28a-F-SAG1;质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中并进行表达.将纯化后的蛋白免疫小鼠,每隔2周免疫一次,共免疫3次,第3次免疫后15 d取小鼠血清.最后,采用蛋白印迹检测蛋白的大小;用酶联免疫吸附方法检测血清中多克隆抗体的效价.结果表明,诱导出的SAG1蛋白大小为30 ku,F-SAG1大小为70 ku.酶联免疫吸附方法检测的D450 nm均为阴性对照的两倍,表明该多克隆抗体具有较高效价.可见,鞭毛素可以作为分子佐剂促进弓形虫亚单位疫苗的体液免疫应答.