弓形虫SAG1基因功能片段的克隆、表达与抗原性分析

• 作者: 刘晋平 刘转转 张建伟 殷国荣 王海龙 赵丰
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 SAG1 原核表达 蛋白纯化 抗原性
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 481-484
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3552字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2009.06.001

摘要

目的 重组、表达与纯化弓形虫速殖子主要表面抗原1(SAG1)具有生物活性的功能多肽,分析其抗原性.方法 根据SAG1的基因序列设计引物,截除其前端的信号肽和后端的疏水区,只扩增650 bp的功能区域;将该片段重组入带有His标签的pET-30a(+)质粒,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其在E.coli中表达,调整诱导表达时间、IPTG浓度等条件,高效稳定地表达出目的 蛋白;镍柱亲和层析法纯化目的 蛋白,Western-blot检验纯化后蛋白的抗原性.结果 成功构建pET-30a(+)/SAG1重组质粒,使其在E.coli中高效稳定地可溶性表达,并确定出在0.5 mmol/L IPTG浓度下诱导12 h为最佳表达条件,Western-blot显示纯化后的蛋白具有良好的抗原性.结论 获得了可溶性的弓形虫SAG1基因功能片段表达的产物,其具有良好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘晋平	山西农业大学动物科技学院	16	92	5.0	9.0
2	赵丰	山西医科大学第一临床医学院	4	7	2.0	2.0