弓形虫表面抗原SAG2基因片段的克隆与原核表达

• 作者: 吴少庭 周爱琴 张仁利 林敏 翁亚彪 高世同 龙彩虹
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 SAG2表面抗原 克隆 GST融合表达 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 42-45
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3344字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.02.011

摘要

目的扩增弓形虫主要表面抗原(SAG2)编码基因片段并进行重组表达.方法设计合成1对引物,从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因序列,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHⅠ和SalⅠ进行双酶切、纯化后,再插入表达载体pGEX-4T-2,经PCR和双酶切筛选,测序验证后,在大肠杆菌中进行表达,并用SDS-PAGE和Westem blot鉴定.结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约477bp的SAG2基因,构建成功了重组质粒pGEX-4T-2-SAG2;SAG2基因在大肠杆菌中得到高效表达.SDS-PAGE电泳pGEX-4T-2-SAG2的融合蛋白条带的分子量约为42kD,Westen-blot显示融合蛋白能被兔抗弓形虫血清识别.结论GST融合表达载体的构建和SAG2基因片段成功表达,为进一步为SAG2重组疫苗及重组诊断抗原的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翁亚彪	华南农业大学动物医学院预防系	99	569	13.0	19.0
2	周爱琴	华中科技大学同济医学院	9	155	7.0	9.0
3	龙彩虹	华南农业大学动物医学院预防系	7	27	3.0	5.0
4	吴少庭		12	95	6.0	9.0
5	高世同		14	100	6.0	9.0
6	张仁利		7	41	4.0	6.0
7	林敏		20	165	8.0	12.0