弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定

• 作者: 占国清 吴少廷 林敏 梁驹卿 高世同
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫P22表面抗原基因克隆序列测定
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 62-64
• 页数: 3页
• 分类号: R382.5
• 字数: 1830字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2000.02.019

摘要

目的　克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法　设计合成1对引物，采用PCR法扩增出P22目的　基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BamH Ⅰ和Kpn Ⅰ双酶切后，插入质粒载体p5.6的多克隆位点，构建重组体p5./P22，并转化大肠杆菌DH5a，快速酚法初筛阳性重组子，并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果　从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带，与预期扩增片段大小相符，空白对照无特异性扩增条带；所构建p5./P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果　一致；序列测定的结果　确证了插入片段的正确性。结论　体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段，并经序列分析所验证，为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁驹卿		13	82	6.0	9.0