刚地弓形虫抗原基因SAG2的克隆、表达和纯化

• 作者: 何国声 崔立 徐梅倩 黄燕
• 来源期刊: 中国兽医寄生虫病
• 学科: 农学
• 关键词: 刚地弓形虫 SAG2 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 8-12
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723
• 字数: 3220字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2007.06.002

摘要

目的 克隆刚地弓形虫抗原基因SAG2,并在大肠杆菌中进行高效表达及纯化.方法 设计引物从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因序列,构建pGEX-4T-SAG2重组质粒,双酶切鉴定后,在大肠杆菌中进行表达,并对其表达条件进行优化,所表达蛋白用GST亲和层析柱进行纯化.结果 经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白约为41KD.Western-blotting表明该蛋白能与兔抗弓形虫血清特异性结合.培养基2 ×YTA,IPTG浓度0.1 mmol/L,诱导时间3 h,培养温度30℃,摇瓶转速220 r/min是GST-SAG2融合蛋白表达的最佳条件,且得到的是可溶性融合蛋白GST-SAG2.结论 得到高效表达的SAG2抗原蛋白,为建立弓形虫病快速免疫诊断试剂盒打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔立		75	540	15.0	20.0