刚地弓形虫P30(SAG1)重组抗原的高效表达和体外纯化

• 作者: 公茂庆 刘克义 宰德富 崔勇 张佃波 李瑾 魏庆宽 黄炳成
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 P30基因 融合蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1089-1093
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.12.015

摘要

目的表达和纯化弓形虫P30(SAG1)蛋白,为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制奠定基础.方法 PCR法从弓形虫基因组DNA 中扩增 P30基因片段,P30产物克隆到表达质粒pET-30a(+) 构建重组载体,将其转化到DH5α中.经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,阳性重组质粒转化到大肠埃氏菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定.大量的诱导表达产物用SNBC 3S NTA Resin方法纯化并进行复性.结果扩增的P30基因片段为750bp, 重组表达融合蛋白量单位为30ku,与理论值相符.结论成功构建重组体,获得纯化和复性的弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏庆宽		33	113	6.0	9.0
2	李瑾		18	80	6.0	8.0
3	崔勇		14	43	4.0	6.0
4	黄炳成		27	151	7.0	10.0
5	张佃波		13	71	5.0	8.0
6	公茂庆		42	145	8.0	9.0
7	刘克义		18	98	7.0	9.0
8	宰德富		4	25	3.0	4.0