弓形虫P30基因MBP融合蛋白的表达

• 作者: 丛华 古钦民 李瑛 禹卉 黄勇
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 P30基因 融合 表达
• 年，卷（期）: 2000,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-31
• 页数: 3页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2498字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2000.01.009

摘要

目的构建弓形虫主要表面抗原P30基因的原核表达载体并在E.coli中表达。方法根据已发表的弓形虫P30基因序列，自行设计合成一对引物并在引物5'端分别引入限制性内切酶EcoRI、SalI酶切位点，用PCR技术从弓形虫RH株基因组DNA中扩增P30基因片段，插入pMALP2质粒转化大肠杆菌DH5a α感受态细胞，于氨苄LB培养平板上筛选阳性克隆，经过酶切及PCR扩增签定重组子。将阳性重组子经IPTG诱导表达，SDS-PAGE及免疫印迹分析。结果从弓形虫RH株DNA中扩增出976bp的P30基因，构建成功pMALP2～P30重组质粒；SDS-PAGE电泳及Western-blot显示MBP/P30融合蛋白条带的分子量约为77.5kD，减去MBP的分子量43kD，得出P30蛋白分子量为34.5kD，且能被弓形虫高免鼠血清识别。结论从弓形虫基因组DNA中获取P30基因，并成功构建pMALP2-P30重组质粒，诱导表达了P30的融合蛋白。为进一步P30蛋白的分离纯化及其对动物的免疫原性研究作好准备。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李瑛	山东医科大学寄生虫教研室	3	6	1.0	2.0
2	丛华	山东医科大学寄生虫教研室	3	8	2.0	2.0
3	古钦民	山东医科大学寄生虫教研室	3	13	2.0	3.0
4	黄勇	山东医科大学寄生虫教研室	2	5	1.0	2.0
5	禹卉	山东医科大学寄生虫教研室	2	5	1.0	2.0