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摘要:
目的在大肠杆菌中高效表达弓形虫抗原GRA6.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株和RH株总DNA中分别扩增到编码GRA6的基因,经DNA序列分析后导入表达载体PGEX-5X-3,然后在大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中进行表达,以SDS-PAGE和Westen blotting进行鉴定,用GST亲和层析柱纯化表达产物.结果1.在我们所比较的336个碱基中,弓形虫昆山分离株与RH株之间碱基基本一致.2.得到一分子量为49kDa的融合蛋白,占大肠杆菌总蛋白的25.55%,通过Westen blotting证实,该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所识别.结论1.弓形虫昆山分离株和RH株的GRA6基因片段几乎完全一致;2.在大肠杆菌中得到了高效表达的融合蛋白;3.该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所别,可用于构建具有高度敏感性和特异性的弓形虫病检测试剂盒.
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文献信息
篇名 弓形虫GRA6抗原基因的克隆与表达
来源期刊 中国人兽共患病杂志 学科 医学
关键词 弓形虫 致密颗粒抗原-6 聚合酶链反应 基因表达
年,卷(期) 2003,(2) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 50-54
页数 5页 分类号 R382.5
字数 4239字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.02.013
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 黄伟达 复旦大学生命科学院生物化学系 57 398 13.0 15.0
2 陆惠民 苏州大学医学院病原生物学教研室 29 185 9.0 11.0
3 张惠琴 苏州大学医学院病原生物学教研室 23 211 9.0 13.0
4 丁天 复旦大学生命科学院生物化学系 3 14 2.0 3.0
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研究主题发展历程
节点文献
弓形虫
致密颗粒抗原-6
聚合酶链反应
基因表达
研究起点
研究来源
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相关学者/机构
期刊影响力
中国人兽共患病学报
月刊
1002-2694
35-1284/R
大16开
福建省福州市津泰路76号
34-46
1985
chi
出版文献量(篇)
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38474
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