弓形虫GRA6抗原基因的克隆与表达

• 作者: 丁天 张惠琴 朱翔 陆惠民 黄伟达
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 致密颗粒抗原-6 聚合酶链反应 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 50-54
• 页数: 5页
• 分类号: R382.5
• 字数: 4239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.02.013

摘要

目的在大肠杆菌中高效表达弓形虫抗原GRA6.方法采用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫昆山分离株和RH株总DNA中分别扩增到编码GRA6的基因,经DNA序列分析后导入表达载体PGEX-5X-3,然后在大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)-RP中进行表达,以SDS-PAGE和Westen blotting进行鉴定,用GST亲和层析柱纯化表达产物.结果1.在我们所比较的336个碱基中,弓形虫昆山分离株与RH株之间碱基基本一致.2.得到一分子量为49kDa的融合蛋白,占大肠杆菌总蛋白的25.55%,通过Westen blotting证实,该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所识别.结论1.弓形虫昆山分离株和RH株的GRA6基因片段几乎完全一致;2.在大肠杆菌中得到了高效表达的融合蛋白;3.该重组抗原能被弓形虫感染的人特异性IgM和IgG血清所别,可用于构建具有高度敏感性和特异性的弓形虫病检测试剂盒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄伟达	复旦大学生命科学院生物化学系	57	398	13.0	15.0
2	陆惠民	苏州大学医学院病原生物学教研室	29	185	9.0	11.0
3	张惠琴	苏州大学医学院病原生物学教研室	23	211	9.0	13.0
4	丁天	复旦大学生命科学院生物化学系	3	14	2.0	3.0