弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因的克隆与表达

• 作者: 吴少庭 张仁利 林绮萍 潘晖榕 翁亚彪 袁仕善 雷明军 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 GRA4 PCR 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 500-503
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3020字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.06.011

摘要

目的克隆和表达弓形虫RH株致密颗粒蛋白GRA4基因.方法根据GRA4基因序列,设计合成一对引物,用聚合酶链式反应(PCR)方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增GRA4基因片段,插入pMD18-T载体,并转化大肠杆菌JM109,经PCR、双酶切、测序验证后,将GRA4基因片段定向亚克隆到载体pGEX-4T-2中构建原核表达重组质粒pGEX-4T-2-GRA4,重组子在E.coli BL21中经IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出GRA4基因片段并诱导表达出能被兔抗弓形虫血清识别的重组GRA4蛋白.结论成功构建和表达了弓形虫pGEX-4T-2-GRA4重组质粒,为弓形虫病诊断抗原和疫苗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翁亚彪	华南农业大学兽医学院	99	569	13.0	19.0
2	张仁利		192	798	13.0	17.0
3	高世同		137	593	11.0	15.0
4	黄达娜		134	499	10.0	13.0
5	吴少庭		72	281	9.0	12.0
6	林绮萍	华南农业大学兽医学院	7	15	2.0	3.0
7	袁仕善		20	86	5.0	8.0
8	雷明军	华中科技大学同济医学院	11	23	3.0	4.0
9	潘晖榕	华中科技大学同济医学院	8	15	3.0	3.0