刚地弓形虫peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析

• 作者: 凡振伟 刘转转 张建中 殷国荣 王海龙 马广源
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 刚地弓形虫 Peroxiredoxin 克隆 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 334-337
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.04.009

摘要

目的 对刚地弓形虫peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析.方法 收集、纯化RH株弓形虫速殖子,提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和XhoI酶切位点,RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE进行鉴定,重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性.结果 从弓形虫RH株cDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段,并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果 表明,目的 基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达.重组蛋白的相对分子量约32kDa,Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别.结论 RH株刚地弓形虫peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达,该重组蛋白具有免疫原性,有望作为弓形虫疫苗的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张建中	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	140	649	13.0	18.0
2	凡振伟	山西医科大学第一临床医学院	2	27	2.0	2.0