融合胸腺素α1的猪干扰素α在毕赤酵母中的表达及效价测定

• 作者: 余晓岚 刘敏 张晨瑶 王飞 翟彦生 肖颖 马立新
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 干扰素 胸腺素Tα1 毕赤酵母表达系统 细胞病变抑制法
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 克隆与表达研究专栏
• 页码范围: 347-353
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.91|Q782
• 字数: 4425字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2017.04.004

摘要

猪干扰素α(IFN-α)是在特定条件下由细胞产生的一种具有广谱、高效抗病毒活性的可溶性糖蛋白,胸腺素α1(Tα1)是一种具有免疫调节的活性肽.本研究中将Tα1基因与去掉信号肽序列的猪IFN-α N端融合,构建酵母表达载体PHBM-Tα1-IFNα,同时构建单独表达IFNα的重组质粒PHBM-IFNα,重组质粒电转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株,甲醛诱导表达.利用SDS-PAGE法检测融合蛋白的表达,并用细胞病变抑制法测定干扰素的效价.实验结果表明,酵母表达上清中IFNα的效价为2.916×106 U/mL;Tα1-IFNα的效价为2.860×107 U/mL,该结果证实胸腺素α1可提高融合表达蛋白猪干扰素的活性,因此,通过酵母表达体系获得高活性胸腺素-猪干扰素融合蛋白,可为高效、低成本获得抗病毒药物提供一种新的模式.