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摘要:
目的 探究GSTP1在不同阶段结肠癌组织中的表达水平,并查找可能对GSTP1表达产生调控作用的微小分子RNA(miR)及其对结肠肿瘤细胞的影响.方法 利用实时定量PCR和蛋白印迹分析检测GSTP1在结肠癌组织中的表达水平;构建载体pcDNA3.1-GSTP1并转染到培养的人类结肠癌细胞系HCT116中,检测细胞的凋亡率与活性水平;利用TargetScan和MicroCosm Targets程序分析GSTP1的3'UTR序列并查找能够结合GSTP1的miR,构建载体pGL3-GSTP1-3'UTR,共转染该miR与pGL3-GSTP1-3' UTR到人类肾脏上皮细胞系HEK293中,荧光素酶报告分析验证该miR对GSTP1表达的靶向调控作用;转染该miR到HCT116中,检测GSTP1表达水平与细胞的活性氧(ROS)水平;共转染该miR与pcDNA3.1-GSTP1到HCT116中,检测细胞的ROS水平与活性水平.结果 GSTP1在不同阶段结肠癌样本中的表达水平均上升,在低营养环境下,高表达GSTP1的HCT116细胞凋亡率下降,细胞活性上升.而miR-133b在GSTP1的3'UTR序列区域有特异性结合位点,在转录后水平下调GSTP1的表达.在低营养环境下,过表达miR-133b的HCT 116细胞活性水平显著下降,ROS水平显著上升;在正常营养环境下,高表达miR-133b无显著影响.此外,在低营养环境下,过表达miR-133b的HCT116细胞同时过表达GSTP1,则细胞活性水平下降程度和ROS水平上升程度均减小.结论 低营养环境下miR-133b能够通过对GSTP1的抑制作用削弱结肠肿瘤细胞的生存能力.
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篇名 miR-133b调控GSTP1表达降低结肠肿瘤细胞在低营养环境下的生存能力
来源期刊 四川大学学报(医学版) 学科
关键词 GSTP1 miR-133b 结直肠癌 低营养环境
年,卷(期) 2017,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 699-704
页数 6页 分类号
字数 语种 中文
DOI
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序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李昂 四川大学生命科学学院 23 84 5.0 9.0
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节点文献
GSTP1
miR-133b
结直肠癌
低营养环境
研究起点
研究来源
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引文网络交叉学科
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1672-173X
51-1644/R
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62-72
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