大鼠疑似泰勒氏病毒荧光定量检测方法的建立

• 作者: 张泉 林颖峥 熊炜 蔡骁垚 陈懿斐 陈鸿军 魏晓锋
• 来源期刊: 中国实验动物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 大鼠 疑似泰勒氏病毒 TaqMan 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 433-437
• 页数: 5页
• 分类号: Q95-33
• 字数: 3105字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4847.2017.04.015

摘要

目的 建立一种能在临床上快速、准确地检测大鼠疑似泰勒氏病毒(Theiler''s-like virus of rats, TLV)的方法,采用TaqMan探针荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术,特异性针对TLV病毒核酸进行检测.方法 通过基因合成序列作为质粒标准品的模板,同时选择特异性的序列在3622~3729 nt处,设计一对引物和TaqMan性探针,优化反应体系及条件,进行qPCR扩增,从而建立TLV TaqMan探针qPCR方法,并对其灵敏度、稳定性和特异性进行评价.结果 建立的TLV qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R2值可达到0.99,灵敏性最低能够检测到10个拷贝数/μL,对比普通PCR方法,高出其100倍;对其他常见大鼠病毒均无非特异反应;重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%.结论 利用TaqMan探针建立快速检测TLV的荧光定量PCR方法,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等特点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张泉	扬州大学兽医学院	51	346	8.0	17.0
2	熊炜		37	146	7.0	9.0
3	魏晓锋		30	60	4.0	5.0
4	蔡骁垚	中国农业科学院上海兽医研究所	4	22	1.0	4.0
8	陈懿斐		6	10	1.0	3.0
9	林颖峥		13	17	3.0	3.0
10	陈鸿军	中国农业科学院上海兽医研究所	57	114	6.0	8.0