心脏转录因子Nkx2-5、GATA-4真核表达质粒的构建

• 作者: 张敏鸿 杨建琼 罗耀玲 赖平 邱悦群
• 来源期刊: 赣南医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 转录因子 Nkx2-5 GATA-4 重组质粒 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 42-45
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2+8
• 字数: 2927字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5779.2017.01.011

摘要

目的:构建人类心脏特异性转录因子Nkx2-5、GATA-4的真核表达质粒,探讨Nkx2-5、GATA-4在心脏发育及先天性心脏病发病过程中的作用奠定基础.方法:以质粒人脑cDNA为模板,并设计上下游引物扩增Nkx2-5、GATA-4编码区序列.将真核表达载体pCDNA 3.1-HA、pCDNA 3.1-flag分别和Nkx2-5、GATA-4的PCR产物分别在双酶切后用T4连接酶连接,构建重组质粒pCDNA 3.1-HA-Nkx2-5、pCDNA 3.1-flag-GATA-4,转化至大肠杆菌,质粒抽提后经PCR、双酶切及测序鉴定.结果: 成功设计引物扩增出Nkx2-5、GATA-4基因编码区约1 kbp及1.3 kbp的目的片段,PCR和酶切鉴定结果显示,构建的重组真核表达质粒中含有正确的Nkx2-5、GATA-4基因序列.结论:成功构建了含有Nkx2.5、GATA4的真核表达重组质粒,为后续研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱悦群	赣南医学院第一附属医院心内科	20	58	4.0	6.0
2	赖平		11	29	4.0	5.0
3	罗耀玲	赣南医学院第一附属医院临床科研中心	22	86	5.0	7.0
4	杨建琼	赣南医学院第一附属医院临床科研中心	34	85	6.0	8.0
5	张敏鸿	赣南医学院第一附属医院临床科研中心	8	16	2.0	4.0