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摘要:
目的 克隆甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase)基因adhA,在大肠杆菌中表达、纯化,并研究其酶学性质.方法 PCR扩增甲醛脱氢酶基因adhA,构建表达载体pTIG-AdhA,在BL21(DE3)中诱导表达,经Ni+亲和层析纯化,利用AHMT法进行体外酶学性质分析.结果 成功构建甲醛脱氢酶表达载体,在大肠杆菌中AdhA表达量达总蛋白的50%以上,其中大部分表达产物可溶,纯化得到纯度为95%的甲醛脱氢酶.甲醛脱氢酶能以甲醛为底物,最适pH为7.0,最适反应温度为30℃,室温保存6 d后酶活约保留60%.结论 在大肠杆菌中实现了甲基营养菌甲醛脱氢酶的可溶表达,在所考察的底物中,甲醛为该酶的最适底物.
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文献信息
篇名 甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶的表达、纯化及酶活性质
来源期刊 军事医学 学科 生物学
关键词 甲基营养菌属 醛脱氢酶 克隆 纯化 酶学性质
年,卷(期) 2017,(5) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 381-384
页数 4页 分类号 Q939.1
字数 3971字 语种 中文
DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.05.012
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作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 景爱霞 1 0 0.0 0.0
2 毕波 1 0 0.0 0.0
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6 张惟材 1 0 0.0 0.0
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