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甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶的表达、纯化及酶活性质
甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶的表达、纯化及酶活性质
作者:
张惟材
景爱霞
李彤
毕波
汪建华
熊向华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
甲基营养菌属
醛脱氢酶
克隆
纯化
酶学性质
摘要:
目的 克隆甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase)基因adhA,在大肠杆菌中表达、纯化,并研究其酶学性质.方法 PCR扩增甲醛脱氢酶基因adhA,构建表达载体pTIG-AdhA,在BL21(DE3)中诱导表达,经Ni+亲和层析纯化,利用AHMT法进行体外酶学性质分析.结果 成功构建甲醛脱氢酶表达载体,在大肠杆菌中AdhA表达量达总蛋白的50%以上,其中大部分表达产物可溶,纯化得到纯度为95%的甲醛脱氢酶.甲醛脱氢酶能以甲醛为底物,最适pH为7.0,最适反应温度为30℃,室温保存6 d后酶活约保留60%.结论 在大肠杆菌中实现了甲基营养菌甲醛脱氢酶的可溶表达,在所考察的底物中,甲醛为该酶的最适底物.
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嗜热芽孢杆菌丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶的基因克隆、蛋白表达纯化及活性分析
嗜热菌
丙酮酸激酶
乳酸脱氢酶
原核表达
酶活性测定
内容分析
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文献信息
篇名
甲基营养菌MP688甲醛脱氢酶的表达、纯化及酶活性质
来源期刊
军事医学
学科
生物学
关键词
甲基营养菌属
醛脱氢酶
克隆
纯化
酶学性质
年,卷(期)
2017,(5)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
381-384
页数
4页
分类号
Q939.1
字数
3971字
语种
中文
DOI
10.7644/j.issn.1674-9960.2017.05.012
五维指标
作者信息
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景爱霞
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期刊影响力
军事医学
主办单位:
军事医学科学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-9960
CN:
11-5950/R
开本:
大16开
出版地:
北京太平路27号
邮发代号:
82-757
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
4313
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13
总被引数(次)
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