三疣梭子蟹PtCrustin3成熟肽在毕赤酵母中的重组DNA表达

• 作者: 卢希阳 陶妍
• 来源期刊: 山东农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 三疣梭子蟹 RT-PCR PtCrustin3成熟肽 毕赤酵母 重组表达
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 页码范围: 303-309
• 页数: 7页
• 分类号: TQ465.6
• 字数: 4811字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/i.issn.1000-2324.2017.02.029

摘要

Crustin抗菌肽是一类由甲壳动物表达的具有抗菌作用的小分子肽,它们在动物抵御病原微生物侵染的免疫系统中发挥了重要作用,被认为是替代抗生素的良好候选者.Crustin的N端含有一个信号序列,与之相连接的C端为成熟肽序列,内含一个WAP(Whey acidic protein)结构域,为Crustin的活性区域;根据信号肽与WAP结构域之间的结构差异,可以将Crustin分为三种类型.本文以三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)Ⅰ型Crustin的一个同工型“PtCrustin3”的成熟肽(mPtCrustin3)为研究对象,通过RT-PCR从鳃中克隆到编码mPtCrustin3的cDNA,并通过巢式PCR对其添加EcoRI和XbaⅠ酶切位点以及6×His标签.以pPICZαA为真核表达载体,成功构建了重组表达载体pPICZαA-mPtCrustin3,电转入毕赤酵母X-33,在29℃、250 r/m的条件下,经1.0％甲醇诱导表达96 h后,获得的表达产物经Tricine-SDS-PAGE分析,证明分子量约为11.6 kD的重组体mPtCrustin3在毕赤酵母X-33中被成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶妍	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	34	379	6.0	19.0
2	卢希阳	上海海洋大学食品学院上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心	1	1	1.0	1.0