猪β-防御素cDNA在枯草芽孢杆菌中的高效表达

• 作者: 张皓然 李钢 温静 王娜 苟兴华 邹辉琴 陈松
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪β-防御素 基因表达 活性检测 枯草芽孢杆菌
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 1910-1913
• 页数: 4页
• 分类号: S828
• 字数: 3814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2017.8.037

摘要

[目的]猪β-防御素(β-defensin)是猪自身分泌的一种能够杀菌、调节免疫功能的小分子抗菌肽,是猪生长繁殖不可缺少的蛋白质.[方法]根据NCBI数据库中的猪防御素cDNA序列,人工合成该基因序列,同时引入相关调控序列及适当酶切位点.酶切该人工合成的DNA后,连接到表达载体pHT43中,然后转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,获得的转化子用于筛选重组表达质粒.将获得的重组表达质粒pHT43-SS-BD转化到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800N中,获得基因工程菌株.使用蔗糖诱导基因工程菌表达猪β-防御素,SDS-PAGE鉴定其分子量大小,抑菌试验测定其抑菌活性.[结果]SDS-PAGE电泳结果显示在蔗糖诱导后得到约5 KDa的目的蛋白条带;平板抑菌试验结果表明,蔗糖诱导后的上清液对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有抑菌效果,而没加蔗糖的对照组上清液无抑菌效果.[结论]该研究实现猪β-防御素cDNA在枯草芽孢杆菌中的高效表达,为解决抗菌肽来源限制及枯草芽孢杆菌的生产应用奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苟兴华		16	86	6.0	8.0
2	王娜		3	5	2.0	2.0
3	李钢		5	5	1.0	2.0
4	邹辉琴		5	5	1.0	2.0
5	温静		5	5	1.0	2.0
6	陈松		1	3	1.0	1.0
7	张皓然		1	3	1.0	1.0