贮藏期猕猴桃果实表面溃疡病病原菌的快速检测方法研究

• 作者: 孙强 张鑫 徐雅芬 曹凡 朱丹 李朝正 杜莹琳 王铎 高贵田
• 来源期刊: 核农学报
• 关键词: 猕猴桃溃疡病 丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种 巢式PCR hrpW
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 农产品辐照研究·食品科学
• 页码范围: 493-499
• 语种: 中文
• DOI: 10.11869/j.issn.100-8551.2017.03.0493

摘要

为建立猕猴桃果实表皮溃疡病病原菌(Psa)的快速检测方法,以陕西周至县贮藏期的海沃德猕猴桃为材料,用King's B液体培养基培养获得果实表面病原菌,采用细菌DNA提取试剂盒及热裂解法提取总DNA;根据陕西猕猴桃Psa的hrpW保守区设计2对特异引物进行巢式PCR扩增,并对扩增产物进行测序.结果表明,从4个猕猴桃贮藏库抽取40个样品,其中8个样品检测出阳性扩增;对特异扩增得到的550bp的hrpW序列进行BLAST对比分析,发现该序列与丁香假单胞杆菌猕猴桃致病性变种(Pseudomonas syringae pv.actinidiae)的hrpW序列同源性为99％.此外,本试验建立的巢式PCR检测方法对Psa的检出限为103 cfu·mL-1,检测方法特异性强,灵敏度高,能减少假阳性的出现,保证了快速检测结果的可靠性,为控制猕猴桃果实传播Psa提供了理论依据.