过表达TRPM7蛋白对HEK293细胞氧糖剥夺再氧合损伤后NF-κB活化的影响

• 作者: 张静 李刚 沈伟 王喜丰 王岚
• 来源期刊: 华中科技大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: TRPM7 Toll样受体4 HEK293细胞 氧糖剥夺再氧合 NF-κB活化
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 117-121
• 页数: 5页
• 分类号: R364.12
• 字数: 4072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2017.02.001

摘要

目的 探讨过表达瞬时受体电位通道M7(transient receptor potential melastatin type 7 channel,TRPM7)蛋白对人胚肾293细胞(human embryonic kidney 293 cells,HEK293)氧糖剥夺再氧合(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤后细胞核内核转录因子kappa B(nuclear factor κB,NF-κB)表达水平的影响,并研究上述变化是否通过Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)蛋白介导.方法 运用重组DNA技术建立四环素调控稳定性表达TRPM7的HEK293细胞系(293-TRPM7/WT):加入四环素诱导稳定表达TRPM7的293-TRPM7/WT细胞称为Tet(+)细胞,未加入四环素的293-TRPM7/WT细胞称为Tet(-)细胞.通过免疫印迹技术鉴定上述细胞,予以氧糖剥夺1 h/再氧合24 h处理后,运用免疫印迹技术检测细胞核内NF-κB p65蛋白和TLR4蛋白的表达;在Tet(+)细胞OGD处理前1 h加入TLR4特异性抑制剂TAK242或同体积二甲基亚砜(DMSO),使用免疫印迹技术检测细胞核内NF-κB p65蛋白表达的变化.结果 ① Tet(-)细胞在经过OGD/R处理后,细胞核内NF-κB的表达增加(P<0.05),而Tet(+)细胞在OGD/R后核内NF-κB的表达量与经过同样处理的Tet(-)细胞相比增加更为显著(P<0.05);② Tet(-)细胞在OGD/R损伤后细胞内TLR4的表达升高(P<0.05),与之相比,Tet(+)细胞在OGD/R处理后TLR4的表达量则更为升高(P<0.05);③ Tet(+)细胞经过OGD/R处理,并加入TLR4特异性抑制剂TAK242后,与未加药组或DMSO组相比,细胞核内NF-κB蛋白表达明显下降(均P<0.05).结论 过表达TRPM7增加OGD/R后293-TRPM7/WT细胞内TLR4蛋白的表达,并通过TLR4介导加速OGD/R后NF-κB的活化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张静	华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科	219	1718	21.0	31.0
2	李刚	华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科	87	932	16.0	27.0
3	王岚	华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科	30	161	6.0	10.0
4	王喜丰	华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科	6	94	3.0	6.0
5	沈伟	华中科技大学同济医学院附属普爱医院神经内科	13	136	4.0	11.0