PK-15细胞在微载体悬浮放大培养及PCV2增殖工艺研究

• 作者: 侯继波 冯磊 刘国阳 华涛 吴培培 唐波 常晨 张道华 张雪花 陈丽
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: PK-15细胞 微载体 消化放大 猪圆环病毒2型 悬浮培养
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产·资源昆虫
• 页码范围: 474-480
• 页数: 7页
• 分类号: S52.651
• 字数: 5859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2017.2.039

摘要

为建立在生物反应器内微载体逐级放大培养PK-15细胞和增殖PCV2技术.采用分批式培养方法,研究了PK-15细胞在微载体胰酶消化放大悬浮培养及猪圆环病毒2型(PCV2)增殖工艺.结果表明,5 g/L的微载体和高糖DMEM下,采用4.0×105cells/mL的初始接种密度及培养至第2天进行换液操作工艺可以获得最佳的PK-15细胞生长效能.胰酶消化转移将PK-15细胞从1L反应器放大至3L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,培养3d细胞密度可达34.3×105 cells/mL.采用感染复数为0.1的接毒比例,细胞接毒后在微载体上传至第3代收获毒液可获得最高的PCV2增殖效价107.25 TCID50/mL.为PCV2疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础.