大菱鲆脑细胞系的建立

• 作者: 刘肖峰 张念伟 王娜 郭华 陈松林 马佳璐
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大菱鲆 大菱鲆脑细胞系 生长 核型
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 820-826
• 页数: 7页
• 分类号: S917.4|Q2-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.05.014

摘要

鱼类细胞系作为一种重要的研究工具已经被广泛地应用于病毒学、环境毒理学、发育生物学以及生理学等研究中.大菱鲆(Scophthalmus maximus)作为一种重要的海水养殖鱼类,尚未见其脑细胞系建立的报道.本研究通过组织块法,以大菱鲆脑组织为材料,建立了大菱鲆脑细胞系(S.maximus brain cell line,SMB).培养细胞系所用的培养基是在DMEM/F12基本培养基中添加了4-羟乙基哌嗪乙磺酸(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid,Hepes)、抗生素(青链霉素)、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)所配成的完全培养基.SMB细胞由上皮样细胞和成纤维样细胞构成,生长分裂旺盛,至今已传40余代.探究温度对其生长的影响,结果表明,SMB细胞在18～30℃均能正常生长,最适生长温度为24℃.核型分析显示,SMB细胞出现了染色体非整倍性,正常二倍体核型(2n=44t)约占43％.通过脂质体转染法成功的将增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)报告基因转入SMB细胞中,并成功地获得了表达,转染率约为30％.该细胞系的建立将为大菱鲆致病性病毒的感染机制、基因功能分析等研究提供新的实验材料.