D-半乳糖诱导的心肌细胞自噬下降与microRNA的表达变化有关

• 作者: 丁宁 侯苗苗 姜怡邓 朱光荣 杨安宁 杨晓玲 杨松昊 王楠 田珏 蒋袁絮 谢琳
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 衰老心肌细胞 自噬 microRNA
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 332-336
• 页数: 5页
• 分类号: R977.3
• 字数: 3653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3949.2017.04.002

摘要

目的 探讨microRNA (miRNA)和衰老心肌细胞自噬之间的关系.方法 使用0、4、8、16、20 g/L D-半乳糖刺激大鼠心肌细胞H9c2衰老,刺激3、6、9天后,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老水平;电镜观察D-半乳糖刺激衰老大鼠心肌细胞自噬体形成;分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测衰老大鼠心肌细胞与正常H9c2细胞中miRNA-30a、miRNA-126、miRNA-204及自噬蛋白LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ表达水平.结果 与对照组比较,随着药物浓度的升高及刺激天数的增加,细胞染色逐渐加深,在D-半乳糖浓度为8 g/L刺激9天时,细胞染色最明显;电镜结果显示,D-半乳糖诱导衰老心肌细胞自噬体减少;Western blot结果显示,衰老心肌细胞LC3B Ⅱ/LC3B Ⅰ水平降低;实时荧光定量PCR结果显示,诱导衰老组心肌细胞中,miRNA-30a、miRNA-126表达水平明显下降,miRNA-204表达水平明显上升.结论 D-半乳糖诱导的衰老心肌细胞自噬水平降低的过程中,存在miRNA-30a、miRNA-126表达水平的降低以及miRNA-204表达水平的增加,miRNA的差异表达可能是衰老心肌细胞自噬水平变化的重要机制.