LMP-1转染人胎盘源间充质干细胞前后蛋白质组学研究

• 作者: 刘志辉 卢亚东 孙梦洁 宋立杰 朱镇 杨军星 杨楠 王博蔚 王瑶 金鑫
• 来源期刊: 口腔医学研究
• 学科: 医学
• 关键词: LMP-1 hPDMSCs 蛋白质组学
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 临床研究论著
• 页码范围: 525-529
• 页数: 5页
• 分类号: R782
• 语种: 中文
• DOI: 10.13701/j.cnki.kqyxyj.2017.05.015

摘要

目的:采用蛋白质组学技术检测LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)转染人胎盘源间充质干细胞(Human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)前后蛋白质组学改变.方法:提取hPDMSCs LMP-1和hPDMSCsvector细胞总蛋白,通过二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)制备两组细胞的二维电泳图谱,并用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异表达的蛋白质点,并用基质辅助激光解吸粒子-飞行时间电离质谱(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析技术对这些差异表达的蛋白质点进行鉴定,并选取6个与成骨相关的蛋白(PCNA,vimentin,annexin A1,annexin A2,eEF2和peroxiredoxin-1)作为验证对象,蛋白质印迹法检测各蛋白在两组细胞中的表达水平.结果:采用2-DE技术建立了hPDMSCsLMP-1和hPDMSCsvector两组细胞的二维电泳图谱;PDQuest软件分析图像发现两组细胞有22个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-MS质谱初步鉴定出15个蛋白质点,其中表达上调9个,下调6个.Western blot检测结果与蛋白质组学一致.结论:LMP-1基因转染hPDMSCs后共筛选获得15个差异表达的蛋白,它们是成骨分化潜在的重要参与者,为进一步阐明LMP-1对hPDMSCs细胞功能和成骨分化影响的分子机制奠定基础.