茶树甲羟戊酸激酶基因CsMVK克隆及表达特性分析

• 作者: 叶乃兴 姚雪倩 曹红利 杨国一 王鹏杰 郑知临 陈丹 陈笛
• 来源期刊: 南方农业学报
• 关键词: 茶树 甲羟戊酸激酶(MVK) 乌龙茶 做青 表达特性 香气
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·分子生物学
• 页码范围: 1741-1747
• 页数: 7页
• 分类号: S571.103.53
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1191.2017.10.03

摘要

[目的]克隆茶树甲羟戊酸激酶基因(CsMVK),分析其生物学信息及在不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性,为研究茶叶加工过程中香气形成机制提供参考.[方法]RT-PCR扩增CsMVK基因,应用生物信息学软件对其编码蛋白(CsMVK)的氨基酸序列进行预测分析,通过实时荧光定量PCR(qPCR)分析CsMVK在茶树不同组织及乌龙茶做青过程中的表达特性.[结果]克隆获得的CsMVK基因(GenBank登录号MF668187)全长1455 bp,开放阅读框(ORF)长度为1164 bp,编码387个氨基酸,蛋白质分子量41.18 kD,理论等电点(pI)5.88.CsMVK蛋白具有GHMP_kinases_N domain和GHMP_kinases_C domain 2个功能结构域,定位于细胞质中,不存在跨膜结构和信号肽.系统发育进化树分析结果显示,CsMVK与三七、常春藤的MVK聚为一类,表明茶树与三七、常春藤的亲缘关系最近.qPCR检测结果显示,CsMVK基因在果实中的表达量显著高于其他组织(P<0.05,下同),在不同组织中的表达量排序为:果实>根>叶>茎>花;在乌龙茶做青过程中,从鲜叶到晒青叶,CsMVK基因的表达量上升,晒青到一摇过程中表达量下降,经过3次摇青,其表达量持续升高并在杀青前达最大值,与其他做青阶段差异显著.[结论]CsMVK基因表达与茶叶香气品质形成有关.