鸡新城疫病毒中和单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 冯丽丽 张丽萍 张改平 张雨杭 李赛赛 李青梅 杨艳艳 柴书军 王丽 赵东 邢广旭 郭军庆
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡新城疫病毒 单克隆抗体 免疫过氧化物酶单层细胞试验 血凝抑制试验 中和试验 中和活性
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 127-131
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 4090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.01.023

摘要

采用差速离心法纯化鸡新城疫病毒(NDV)标准毒株F48E8,免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤细胞技术制备抗NDV单克隆抗体,旨在为NDV中和抗原表位分析奠定基础.将NDV感染BHK-21细胞,建立异源免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)的单克隆抗体检测方法,筛选获得14株分泌抗NDV单克隆抗体杂交瘤细胞株,其单克隆抗体腹水IPMA效价均在0.50×10-2～2.56×10-5(F48E8株和LaSota株).血凝抑制试验(HI)结果表明,单克隆抗体1G6、2C1、4D2、5F2和13A5具有血凝抑制活性,其HI效价在(6～12) log2(F48E8株)和(9 ～ 11)log2(LaSota株).病毒中和试验结果表明,单克隆抗体5F2和13A5对F48E8株和LaSota株均有明显的病毒中和活性,中和效价分别为1∶400 ～1∶800和1∶25.夹心ELISA结果表明,单克隆抗体5F2识别NDV HN蛋白,13A5识别F蛋白.综上,成功制备了具有中和活性的NDV单克隆抗体(5F2和13A5).