BCR-ABL SH3-T79Y突变体 重组腺病毒载体的构建及促进白血病K562/G01细胞凋亡

• 作者: 冯文莉 刘鑫 文良雪 李会 黄宁姝 黄峥兰
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 慢性粒细胞白血病 BCR-ABL SH3突变体 重组腺病毒 K562/G01细胞
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 369-375
• 页数: 7页
• 分类号: R733.72
• 字数: 4288字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨构建BCR-ABL SH3-T79Y突变体(简称SH3-T79Y突变体)的重组腺病毒载体及其对白血病耐药细胞株K562/G01细胞凋亡的影响.方法 以pMig210质粒为模板,用重叠延伸PCR扩增SH3-T79Y突变体片段,将其克隆入重组腺病毒载体,通过鉴定、包装、扩增后得到含SH3-T79Y突变体的重组腺病毒.将重组腺病毒感染白血病K562/G01细胞株,测定其感染效率,瑞氏染色检查细胞形态学,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测BCR-ABL、CrkL磷酸化及总蛋白水平.结果 重组腺病毒载体构建成功.SH3-T79Y突变体转染K562/G01细胞株72 h效率大于80%,可见明显的凋亡小体、核聚集等凋亡现象,凋亡率为32.46%,较对照组显著增加(P<0.05);明显抑制BCR-ABL和CrkL的磷酸化水平,降低BCR-ABL总蛋白表达(P<0.05).结论 成功构建SH3-T79 Y突变体重组腺病毒载体,并证实其通过抑制BCR-ABL及底物CrkL磷酸化水平促进K562/G01细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘鑫	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	18	92	6.0	8.0
2	黄峥兰	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	13	25	3.0	5.0
3	李会	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	16	205	4.0	14.0
4	文良雪	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	3	3	1.0	1.0
5	黄宁姝	重庆医科大学检验医学院临床检验诊断学教育部重点实验室	3	3	1.0	1.0