肿瘤BRCA1亚细胞定位对细胞放射线及PARP抑制剂敏感性的影响

• 作者: 刘静 姜桔红 李智 顾莹莹
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: BRCA1亚细胞定位 同源重组修复 放射 PARP抑制剂
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 253-257
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4120字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13315/j.cnki.cjcep.2017.03.005

摘要

目的 探讨肿瘤BRCA1细胞内定位对放射线和PARP抑制剂敏感性的影响.方法 采用siRNA干扰抑制乳腺癌细胞株MCF7内源性BRCA1表达,转染BRCA1细胞内定位不同的载体:pCMV-3xFlag-WT-BRCA1、pCMV-3 xFlag-NES-BRCA1、pC-MV-3xFlag-NIS-BRCA1.采用免疫荧光法检测BRCA1的细胞定位及细胞核γ-H2AX和Rad51核焦点形成,应用流式细胞技术检测细胞凋亡,克隆形成实验检测体外细胞存活.结果 转染WT-BRCA1有47％细胞核表达,23％细胞质表达,30％细胞质和细胞核均表达,NES-BRCA1 mutant表达主要定位于细胞核(87％);NLS-BRCA1 mutant定位于细胞质(82％).WT-BRCA1、NES-BRCA1 mutant和NLS-BRCA1 mutant三种载体转染的细胞4 Gy放射处理后2h,Rad51核焦点阳性细胞数分别为87％、84％及13％;放射后24 h,γ-H2AX核焦点阳性细胞分别为22％、25％及59％.NLS-BRCA1 mutant转染细胞较WT-BRCA1和NES-BRCA1 mutant转染细胞ABT-888和放射处理后诱导的凋亡细胞增加,克隆存活减少.结论 BRCA1的细胞内定位影响DNA双链断裂同源重组修复,并可预测肿瘤对放射和PARP抑制剂的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李智	中山大学附属第一医院病理科	56	293	9.0	14.0