miR-185通过靶向BRCA1抑制三阴乳腺癌细胞的增殖与侵袭

• 作者: 冯燕 延文 杨畅 江涛
• 来源期刊: 中国老年学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 三阴乳腺癌 miR-185 人类乳腺癌易感基因1 生长 侵袭
• 年，卷（期）: 2017,（21）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5257-5260
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 4228字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9202.2017.21.018

摘要

目的 探讨miR-185是否通过靶向人类乳腺癌易感基因(BRCA)1抑制三阴乳腺癌细胞的生长与侵袭及其抗肿瘤机制.方法 采用TargetScan软件预测miR-185靶基因、将野生型或突变型E2F6的3′-UTR区域克隆到荧光素酶报告基因的下游(E2F6-wt或E2F6-mut)并分别与miR-185模拟物(miR-185 mimics)及其无关对照寡核苷酸序列(scramble)、抗miR-185寡核苷酸序列(miR-185-LNA)及其无关对照寡核苷酸序列(control)共转染,荧光素酶报告基因实验验证所预测的靶基因E2F6、qRT-PCR检测转染后靶基因的mRNA表达水平、Western印迹检测转染后靶基因的蛋白表达水平.MTS和Transwell验证不同转染后,三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231的细胞生长增殖活性和侵袭能力.结果 在共转染miR-185 mimics和E2F6-wt、scramble和E2F6-wt两组中,miR-185组荧光素酶活性强度降低了约41.3％(P<0.05).转染miR-185后,E2F6的蛋白和mRNA水平均显著下调,BRCA1的蛋白和mRNA水平均显著上调(P<0.05).在细胞增殖试验中,转染miR-185后,三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长速度显著低于scramble组(P<0.05);与vector组比,BRCA1组可显著抑制三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231的生长(P<0.05),且miR-185+BRCA1组比BRCA1组对细胞生长的抑制作用更加明显(P<0.05).Transwell侵袭实验中,转染miR-185和BRCA1组在36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(100±6)和(100±9),而对照组即转染scramble和转染vector组穿膜细胞数分别为(210±13)和(180±14),即miR-185和BRCA1能明显抑制三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231的穿膜能力,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-185通过靶向调控BRCA1表达而抑制三阴乳腺癌细胞的生长与侵袭.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	延文	武汉市第一医院病理科	7	16	2.0	3.0
2	冯燕	武汉市第一医院病理科	15	37	3.0	5.0
3	江涛	武汉市第一医院病理科	4	117	2.0	4.0
4	杨畅	湖北省第三人民医院呼吸内科	2	3	1.0	1.0