三重qPCR法快速检测肺炎克雷伯菌的方法建立与应用

• 作者: 刘妙娥 林丹丽 桑慧 蔡淑英 邹享珍
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 医学
• 关键词: 肺炎克雷伯氏菌 精准诊断 qPCR rcsA基因 23s RNA基因
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 993-997
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 4685字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立三重qPCR法(实时荧光定量)快速检测肺炎克雷伯氏菌rcsA和23s RNA基因,期以快速精准诊断呼吸道肺炎克雷伯氏菌感染,为早期精准治疗提供依据.方法 根据GenBank公布的肺炎克雷伯氏菌rcsA和23s RNA基因序列选择保守区设计测序引物,高保真扩增东莞樟木头医院分离到的95株肺炎克雷伯氏菌rcsA和23s RNA基因,经测序比对后,避开变异区和突变点分别设计检测引物和探针,建立三重qPCR方法直接检测临床呼吸道样本,并与培养及测序法比较,验证其诊断灵敏度和特异性等性能指标.结果 三重qPCR法检测肺炎克雷伯氏菌rcsA和23s RNA基因,其检测下限低至2 cfu/PCR,检测灵敏度98.9％(94/95),检测特异性97.9％(93/95);诊断灵敏度98.6％(424/430),诊断特异性98.8％(2295/2324);从样品处理到报告结果≤1.2h.结论 该方法简便、快速、灵敏度高、特异性好,可实现呼吸道肺炎克雷伯氏菌感染的快速与精准诊断,为早期精准治疗赢得时间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹享珍	东莞樟木头医院检验科	3	25	3.0	3.0
2	蔡淑英	东莞樟木头医院检验科	1	3	1.0	1.0
3	刘妙娥	东莞樟木头医院检验科	2	7	2.0	2.0
4	林丹丽	东莞樟木头医院检验科	2	7	2.0	2.0
5	桑慧	东莞樟木头医院检验科	2	21	2.0	2.0