黄精多糖对RANKL诱导骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化及体内骨吸收功能的影响

• 作者: 何基琛 吴云乐 宗少晖 彭小明 施雄智 曾高峰 杜力
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 骨组织工程 黄精多糖 破骨细胞 颅骨骨溶解模型 骨质疏松 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2017,（20）
• 所属期刊栏目: 骨组织构建
• 页码范围: 3117-3122
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 7454字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2017.20.001

摘要

背景:骨髓巨噬细胞具有向破骨细胞分化的潜能.黄精多糖可能抑制骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化,有望成为治疗骨质疏松的新药物.目的:探讨黄精多糖对核因子 κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的小鼠骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化及体内骨吸收的影响.方法:培养小鼠骨髓巨噬细胞,在巨噬细胞集落刺激因子和不同质量浓度黄精多糖(5,10,20,40,80,160,320,640,1280,2560 mg/L)干预下,CCK-8法检测黄精多糖对小鼠骨髓巨噬细胞增殖的影响以确定黄精多糖质量浓度范围;在巨噬细胞集落刺激因子和RANKL诱导下给予5,10,20,40,80,160,320,640 mg/L黄精多糖进行干预,不加黄精多糖作为对照组,显微镜下观察细胞形态变化.抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞数目;实时荧光定量PCR检测破骨相关基因抗酒石酸酸性磷酸酶、金属基质蛋白酶9、组织蛋白酶K、活化T细胞核因子c1 mRNA表达.建立脂多糖诱导小鼠颅骨骨溶解模型并给予黄精多糖干预,采用Micro-CT扫描及相关软件定量分析骨体积/组织体积百分比、骨小梁数目、骨小梁间距、骨小梁厚度,并制备组织切片抗酒石酸酸性磷酸酶染色鉴定破骨细胞数目及定量分析骨吸收面积.结果与结论:①与对照组相比,质量浓度在640 mg/L以下的黄精多糖对小鼠骨髓巨噬细胞增殖无明显影响(P>0.05);②不同质量浓度的(40-640 mg/L)黄精多糖可不同程度的减少破骨细胞数目(P<0.01),显著降低了破骨细胞的分化成熟,同时明显降低抗酒石酸酸性磷酸酶、金属基质蛋白酶9、组织蛋白酶K、活化T细胞核因子c1基因的表达(P<0.05);③与脂多糖组相比,黄精多糖能有效缓解脂多糖诱导的颅骨骨溶解,骨体积/组织体积百分比、骨小梁数目、骨小梁间距均减小(P<0.05),破骨细胞数目及骨吸收面明显减少(P<0.01);④说明黄精多糖能够抑制小鼠骨髓巨噬细胞向破骨细胞分化成熟及缓解脂多糖诱导的颅骨骨溶解.